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摘要：本研究旨在聯(lián)合運(yùn)用陽離子多聚物PEI和方波電穿孔兩種不同機(jī)制的轉(zhuǎn)染手段，以期克服精子難轉(zhuǎn)染的問題。通過形成穩(wěn)定復(fù)合物、吸附細(xì)胞表面、胞吞作用進(jìn)入細(xì)胞、內(nèi)涵體逃逸與DNA釋放等步驟，實現(xiàn)了對小鼠精子的高效核內(nèi)轉(zhuǎn)染，為精子載體法在大動物中的應(yīng)用提供了成功的模式。引言精子載體法是一種以精子為載體，利用精子與卵子結(jié)合的過程將外源基因帶入受精卵中形成轉(zhuǎn)基因動物的方法。該法無需專門的大型設(shè)備和技術(shù)，簡單便捷，應(yīng)用廣泛，尤其對于豬、牛、羊等大動物更有方法學(xué)上的優(yōu)勢，科學(xué)界一直寄厚望于...
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摘要：本研究通過電穿孔技術(shù)將人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶（hTERT）轉(zhuǎn)染至許旺細(xì)胞，旨在提升其增殖能力和抗衰老性能，進(jìn)而為神經(jīng)損傷修復(fù)提供新型細(xì)胞資源。實驗結(jié)果顯示，hTERT轉(zhuǎn)染顯著增強(qiáng)了許旺細(xì)胞的增殖能力和端粒酶活性，優(yōu)化了細(xì)胞形態(tài)。本研究為神經(jīng)損傷修復(fù)策略提供了理論基礎(chǔ)和技術(shù)支持。引言：神經(jīng)損傷疾病嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量，尋找有效的修復(fù)策略顯得尤為關(guān)鍵。許旺細(xì)胞（又稱雪旺細(xì)胞）作為周圍神經(jīng)損傷修復(fù)中的重要細(xì)胞，具有分泌多種神經(jīng)營養(yǎng)因子、引導(dǎo)軸突生長及髓鞘化的功能。然而，許旺細(xì)胞在...
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摘要：本研究旨在建立一種高效的人外周血單核細(xì)胞分離及電穿孔轉(zhuǎn)染方法。通過基于HISTOPAQUE的密度梯度離心及抗體標(biāo)記純化方法分離單核細(xì)胞，并使用某品牌電穿孔儀進(jìn)行轉(zhuǎn)染。結(jié)果顯示，單核細(xì)胞純度高達(dá)89.95%，轉(zhuǎn)染效率為60%～70%。該方法為后續(xù)單核細(xì)胞功能研究提供了可靠的技術(shù)支持。引言人外周血單核細(xì)胞作為免疫系統(tǒng)的重要組成部分，在感染、炎癥及免疫反應(yīng)中發(fā)揮關(guān)鍵作用。為了深入研究單核細(xì)胞的功能及其在各種疾病中的作用機(jī)制，首先需要建立高效的單核細(xì)胞分離和轉(zhuǎn)染方法。單核細(xì)胞的...
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摘要：本研究旨在建立一種高效電穿孔介導(dǎo)siRNA轉(zhuǎn)染原代軟骨細(xì)胞的方法，以實現(xiàn)基因沉默效果并維持較高的細(xì)胞存活率。通過優(yōu)化電穿孔參數(shù)和使用高效電轉(zhuǎn)緩沖液，成功實現(xiàn)了siRNA的高效轉(zhuǎn)染，為基因功能研究和疾病機(jī)制探討提供了有力工具。引言在生命科學(xué)研究領(lǐng)域，RNA干擾（RNAi）技術(shù)已成為研究基因功能和疾病機(jī)制的重要工具。小干擾RNA（siRNA）作為RNAi的關(guān)鍵效應(yīng)分子，能夠特異性地沉默目標(biāo)基因的表達(dá)。然而，由于細(xì)胞類型的多樣性和siRNA的自身特性，siRNA的轉(zhuǎn)染過程面臨...
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摘要：本文詳細(xì)探討了裸質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞的可行性，通過構(gòu)建真核載體PCDNA3.1(+)-EGFP與pEGFP-C3的綠色熒光蛋白表達(dá)系統(tǒng)，驗證了裸質(zhì)粒直接轉(zhuǎn)染細(xì)胞的效率及其影響因素。實驗結(jié)果表明，真核載體可直接通過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞并表達(dá)綠色熒光，但其轉(zhuǎn)染效率與質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和濃度密切相關(guān)。本研究為基因治療及基因功能研究提供了新的思路和方法。引言基因轉(zhuǎn)染是現(xiàn)代分子生物學(xué)研究中的一項基礎(chǔ)且關(guān)鍵的技術(shù)，廣泛應(yīng)用于基因表達(dá)研究、基因功能分析、蛋白質(zhì)生產(chǎn)以及疫苗開發(fā)等領(lǐng)域。傳統(tǒng)的基因轉(zhuǎn)染方法多采...
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摘要：本文旨在通過基因表達(dá)譜芯片技術(shù)篩選能被β干擾素（IFN-β）反式調(diào)節(jié)的靶基因，并研究其生物學(xué)功能及其機(jī)制。實驗構(gòu)建了IFN-β的真核表達(dá)載體，轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞后，利用基因芯片技術(shù)檢測到70條差異表達(dá)基因。這些發(fā)現(xiàn)為深入探索IFN-β的調(diào)節(jié)機(jī)制及其生物學(xué)功能提供了新的依據(jù)。引言β干擾素（IFN-β）作為一種重要的細(xì)胞因子，在抗病毒、抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)等方面發(fā)揮著重要作用。IFN-β能夠調(diào)節(jié)多種細(xì)胞的基因表達(dá)，進(jìn)而影響細(xì)胞的增殖、分化和凋亡等生物學(xué)過程。然而，IFN-β的具...
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摘要：本文詳細(xì)闡述了陽離子多聚體DNA復(fù)合物在基因轉(zhuǎn)染表達(dá)中的特性與價值，構(gòu)建了高效的基因轉(zhuǎn)化體系。通過采用聚乙烯亞胺（PEI）等陽離子多聚體與DNA結(jié)合，形成穩(wěn)定的復(fù)合物，實現(xiàn)了高轉(zhuǎn)染效率和低細(xì)胞毒性。本文還探討了該方法的實驗材料、方法、結(jié)果及創(chuàng)新應(yīng)用前景，為基因治療提供了新思路。引言基因治療作為現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)進(jìn)步的產(chǎn)物，在治療多種疾病中展現(xiàn)出巨大潛力，包括遺傳性疾病、感染性疾病、癌癥、心血管疾病、神經(jīng)性疾病和自身免疫性疾病等。然而，基因治療的關(guān)鍵在于安全有效的基因傳遞...
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摘要本文介紹了一種陽性轉(zhuǎn)染細(xì)胞親和分選方法及試劑盒，該方法通過構(gòu)建一種基于細(xì)胞膜表面定位熒光蛋白標(biāo)簽的親和分選系統(tǒng)，實現(xiàn)了對轉(zhuǎn)染陽性細(xì)胞的高效分選。實驗結(jié)果表明，該系統(tǒng)具有操作簡便、細(xì)胞損傷小、適用性廣等優(yōu)點，為基因功能研究提供了有力工具。引言細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)是現(xiàn)代分子生物學(xué)研究中的一種重要技術(shù)手段，它可以將外源DNA、RNA或其他生物大分子導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)，從而實現(xiàn)對細(xì)胞功能的研究和調(diào)控。然而，在難轉(zhuǎn)染細(xì)胞中，如淋巴瘤/白血病細(xì)胞以及原代細(xì)胞，轉(zhuǎn)染效率往往較低，這限制了這些細(xì)胞為基礎(chǔ)...
